紫外可見光分光光度計的可測波長范圍為200一1000nm，也有波長范圍為200-400nm的紫外分光光度計，但前者較為普遍。紫外可見光分光光度計的構(gòu)造原理與可見光分光光度計(如721型分光光度計)相似。由于玻璃吸收紫外光，因此單色器要用石英棱鏡或光柵。

 

紫外可見分光光度法的定量分析基礎是朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律。即物質(zhì)在一定濃度的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比，物質(zhì)的顏色和它的電子結(jié)構(gòu)有密切的關系，當輻射(光子)引起電子躍遷使分子(或離子)從基 態(tài)上升到激發(fā)態(tài)時，分子(或離子)就會在可見區(qū)或紫外呈現(xiàn)吸光，顏色的發(fā)生或變化是和分子的正常電子結(jié)構(gòu)的變形聯(lián)系的。當分子中含有一個或更多的生色基因(即具有不飽和鍵的原子基團)，輻射就會引起分子中電子能量的改變。

 

紫外可見光分光光度計的三大結(jié)構(gòu)組成部分：

 

1、光源

 

有鎢絲燈及氫燈(或氛燈)兩種。可見光區(qū)(360一1000 nm)使用鎢絲燈;紫外光區(qū) (200一360 nm)則用氫燈或氛燈。

 

2、吸收池

 

由于玻璃吸收紫外光.吸收池要用石英材質(zhì)。

 

3、檢瀏器

 

檢側(cè)器使用兩只光電管，一為氧化艷光電管，用于625一1000 nm波長范圍;另一只是銻艷光電管，用于200一625 nm波長范圍。光電倍增管亦為常用的檢測器，其靈敏度比一般的光電管高2個數(shù)量級。